(Letöltés: Bevezetés a citotoxicitásba PDF formátum)
Számos iparágban fontos az anyagok élő szervezetekre gyakoroltlehetséges káros hatásainak tanulmányozása. Az anyagok vizsgálandótulajdonsága a citotoxikus hatásuk—míg a toxicitás egy általánosabbfogalom az anyagok élő szervezetekre gyakorolt káros hatásainak leírására,addig a citotoxicitás az anyagok sejtekre gyakorolt mérgező hatását jelenti:
👉 A toxikológiai kockázatok értékelése—ISO 10993-17: Egyes szabályozószervek a kivonható és kioldható anyagok kémiai jellemzése mellett azoktoxikológiai vizsgálatát is megkövetelik bizonyos termékek esetében, hogyaz adott eszköz biztonsági határértékei megállapíthatóak legyenek ezekre aszennyeződésekre vonatkozóan. Az ISO 10993-17:2002 szabvány leírja azorvostechnikai eszközökből kioldható anyagok megengedhető mennyiségeimeghatározásának módját. Standardok származtatásához, illetvestandardok hiányában a megfelelő határértékek számításához készült. Egyszisztematikus munkafolyamatot ír le, amivel az orvostechnikaieszközökben jelen lévő toxikológiailag veszélyes anyagok azonosítottkockázatai kvantifikálhatók.
👉 Citotoxicitás—ISO 10993-5 A citotoxicitási vizsgálatok során agyógyászati segédeszköz vagy anyag általános toxicitási szintjét értékeljükin vitroés agaróz táptalajon. Az ISO 10993-5:2009 azorvostechnikaieszközök citotoxicitásának in vitro értékelésére szolgáló vizsgálatimódszereket ismerteti. Ezek a módszerek magukban foglalják a sejtkultúráknak az eszközzel,illetve az eszköz kivonatával, közvetlenül vagy diffúzió révén történőinkubációját. E módszereket arra tervezték, hogy in vitro körülmények között, megfelelőbiológiai paraméterek használatával megismerjék az emlős sejtek biológiaireakcióit.
✔ A citotoxicitás az orvostechnikai eszközök biztonságosságánakértékelése során leggyakrabban vizsgált jelenség. Ezek a vizsgálatokértékelik az eszközök és anyagok citotoxicitási potenciálját—ideértve asejtek növekedésének gátlását és a sejtek elpusztítását—, így egyrészt aszűrés fontos eszközei, másrészt jelentős biológiai információkatadnak ahatóságoknak szóló beadványokhoz.
A citotoxicitási vizsgálat hasznos az orvostechnikai eszközöksejtnövekedésre,-reprodukcióra és morfológiára gyakorolt hatásainakmegismeréséhez:
👉 A citotoxikus vegyületek sejtkárosodást, vagy akár nekrózis vagyapoptózis útján végbemenő sejthalált okozhatnak. Egyes anyagokcitotxicitása magasabb másokénál, és a gyártók mérik a vegyi anyagokcitotoxicitását, hogy meggyőződjenek arról, hogy azok nemkárosak vagyakár halálosak a betegekre nézve, meghatározva az orvostechnikaieszközök és az azokat alkotó anyagok toxicitását. Ezt úgy teszik, hogy aszövetek sejtjeit in vitro kiteszik ezen anyagok és eszközök jelenlétének, ésmegfigyelik a jelentkező hatásokat.
A citotoxicitási vizsgálatokat két csoportba sorolhatjuk:
👉 Kvalitatív módszer
Háromféle kvalitatív vizsgálati eljárás létezik, amelyek eredményeitmikroszkóppal gyűjtjük össze. A vizsgálatok során a citotoxicitásra utalójeleket keresünk, mint például a sejtek méretében vagy alakjában,elrendezésében beállt változásokat, vagy gátolt sejtnövekedést. Ezeket egy0-tól 4-ig terjedő skálán értékeljük, ahol a 0 pont a reakció hiányát jelöli, míga 4-es pontérték komoly reakciókat mutat.
A három kvalitatív vizsgálati eljárás a következő:
Kimosás: A legnépszerűbb kvalitatív vizsgálati módszert, a kimosástextrakciós vizsgálatnak is nevezik. A vizsgálat során a vizsgálni kívántanyag folyékony kivonatát érintkező kapcsolatba hozzák a sejtkultúrával,majd a sejteket három napon át így inkubálják. Ezután megvizsgálják, hogyaz inkubált minta mutatja-e a citotoxicitás jeleit.
Indirekt kontaktusos vizsgálat: Ez az agardiffúziós módszerként is ismertvizsgálat abban áll, hogy egy réteg agart helyezünk a vizsgálandó anyag ésa sejtkultúra közé. Az agarréteg megvédi a sejteket a tesztelendő anyaggalvaló közvetlen fizikai kontaktustól, de lehetővé teszi az anyagból kivonhatóelemeknek és vegyületeknek, hogy az agaron keresztül elérjék asejtkultúrát.
Direkt kontaktusos vizsgálat: A direkt kontaktusos vizsgálat során avizsgálni kívánt anyagok közvetlen érintkezésbe kerülnek a sejtkultúrával.Ezt a módszert általában kis sűrűségű anyagok, például kontaktlencsékesetében használjuk.
👉 Kvantitatív módszer
A kvantitatív módszert MTT-vizsgálatként ismerjük. Az MTT-vizsgálat egykolorimetrikus eljárás, amit akár kivonatok, akár közvetlen kapcsolathasználatával elvégezhetünk. A vizsgálat eredményét a vizsgálandóanyaggal való kapcsolatba kerülés után gátolt, illetve halott sejtekszázalékban kifejezett számarányával értékeljük.
A vizsgálatokat általábanin vitroemlős sejtkultúrákon, például egérsejtekenvégzik el. Az emberi testnek számos védekező mechanizmusa van, amelyvédi a sejteket a sejtmérgektől és a pH-egyensúlytalanságoktól, ezért avizsgálatokin vitrokörülmények között tartott sejteken—ezek nélkülvédekező rendszerek nélkül—való lefolytatása nagyobb fokúérzékenységet kölcsönöz ezeknek a vizsgálatoknak.
Végső soron az eszköz típusa és a használt anyagok határozzák meg,milyen citotoxicitás-vizsgálati módszereket érdemes használnunk.Ugyanakkor a szabályozó szervek útmutatásokat biztosítanak acitotoxicitás vizsgálatához az orvostechnikai eszközök gyártóinak, és ezzelelérkeztünk írásunk utolsó, a téma szabályozási oldaláról szóló részéhez.
A citotoxicitás vizsgálata mindenfajta orvostechnikai eszköz vizsgálatánakkötelező eleme, így a nemzetközi szabványoknak is egyik kulcsfontosságútémája. Nemzetközi szabványok, mint például az ISO 10993 és az FDA kékkönyv memoranduma (#G95-1, ami az 10993-1 szabványon alapszik,foglalkoznak az eszközök biokompatibilitása biztosításánakkulcsfontosságú kérdésével, így számos vizsgálatot azonosítanak, amelyekaz eszközöket alkotó anyagok megválasztásához használandók. Mindentípusú eszköz esetében szükséges elvégezni a sejttoxicitási vizsgálatot azISO 10993-5: „Citotoxicitási vizsgálatok—In vitro módszerek” szabványnakmegfelelően.
A Medistri házon belüli laboratóriumában mélyreható tudássalrendelkezünk a citotoxicitási vizsgálatok folyamatairól, így tudjukelősegíteni az Ön eszközével szemben támasztott szabályozásikövetelményeknek való megfelelést.
🎯 Ha többet szeretne megtudni a Medistri citotoxicitási vizsgálatokkalkapcsolatos szolgáltatásairól, keressefel a www.medistri.swiss honlapunkat, vagy vegye fel a kapcsolatot közvetlenül a munkatársainkkal a contact@medistri.swiss címen.
- A Medistri csapata
#Medistri